بررسی امکان طراحی روش RT – PCR برای تشخیص ازدیاد بیان ژنی ژن HER2 در نمونه های توموری بدخیم پستان

بررسی امکان طراحی روش RT – PCR برای تشخیص ازدیاد بیان ژنی ژن HER2 در نمونه های توموری بدخیم پستان

پایان نامه سرطان پستان
طراحی روش RT – PCR
تشخیص ازدیاد بیان ژنی ژن HER2
شناسایی تومورهای erbB2
شناسایی تومورهای erbB2 با ایمونوهیستوشیمی (IHC)

رفتن به سایت اصلی

رساله دکترای رشته پزشکی

 

بررسی امکان طراحی روش RT – PCR برای تشخیص ازدیاد بیان ژنی ژن HER2 در نمونه های توموری بدخیم پستان

 

 

 

چکیده:

سرطان پستان از شایع ترین سرطان های زنان است که سبب مرگ زنان زیادی می شود. موتاسیون های بسیاری نظیر ازدیاد آنکوژن ها و یا حذف ژن های سرکوبگر تومور در این سرطان شناسایی شده اند؛ در بین آنکوژن ها، erb-B2 که به خانواده EGFR (گیرنده فاکتور رشد اپیدرمی) تعلق دارد در 30%-25% تومورهای پستان با منشاء سلول های داکتال ازدیاد پیدا می کند. (80% سرطان های پستان منشا داکتال دارند.)در بیمارانی که erb-B2 در آن ها ازدیاد پیدا کرده بیماری می تواند تا حدی با استفاده از یک آنتی بادی مونوکلنال انسانی شده علیه محصول پروتئینی ژن erb-B2 به نام هرسپتین مهار شود.از این رو شناسایی تومورها یی که erb-B2 در آن ها ازدیاد پیدا کرده اهمیت دارد.روش روتین در شناسایی این تومورها ایمونوهیستوشیمی (IHC) می باشد.

 

در این مطالعه 50 نمونه از بیمارستان دی جمع آوری شد که بر اساس نتایج IHC، 32% نمونه ها ازدیاد آنکوژن erb-B2 را نشان می دادند.جهت مقایسه RT-PCR و IHC، RNA این نمونه ها استخراج شد و RT-PCR برای آن ها انجام شد که در آن دو جفت پرایمر طراحی شده به طور همزمان ژن erb-B2 را به همراه ژن بتاگلوبین به عنوان کنترل داخلی تکثیر می کردند؛ سپس محصولات RT-PCR بر روی ژل آگاروز برده شدند و شدت باند های مربوط به erb-B2 و کنترل داخلی با یکدیگر مقایسه گردید. در نهایت از مقایسه نتایج حاصله از RT-PCR با نتایج IHC مشخص شد که بازده RT-PCR در تشخیص نمونه های با درجه IHC 3+، 100% و در مورد نمونه های 2+، نیز 100% می باشد.   همچنین آزمایش PCR بر روی DNA استخراج شده از بافت توموری و DNA نرمال استخراج شده از بافت فرد سالم انجام گرفت که نتایج مربوط به این آزمایش نیز نتایج بدست آمده از RT-PCR را تایید می کردند. 

 

 

کلمات کلیدی:

سرطان

داکتال

آنکوژن ها

موتاسیون

سرطان پستان

سرطان های زنان

مقایسه RT-PCR و IHC، RNA

 

 

مقدمه:

 در پستان نرمال، داکتها و لوبولها بوسیله دو نوع سلول فرش می شوند یک دسته سلول های مسطح که یک لایه ناپیوسته از سلول های قابل انقباض حاوی میوفیلامان ها هستند (سلول های میواپی تلیال  ) و روی غشای پایه قرار دارند . این سلول ها در خروج شیر در طی دوره شیر سازی همکاری می کنند و نقش مهمی در حفظ ساختار و عملکرد نرمال لوبول ها و غشای پایه دارند (86). لایه دومی از سلول‌های پوششی کف لومن را فرش کرده است ( سلول های لومینال   ). 

 

داکت های انتهایی و لوبولها شیرتولید می کنند ولی سلول های بخشهای دیگر داکت، در تولید شیر نقشی ندارند.منشأ سلول های لومینال و اپیتلیال ، سلول های بنیادی واقع در ترمینال داکت ها در نظر گرفته  می شود(6). بخش اصلی بستر پستان از بافت پیوندی فیبروس متراکم مخلوط با بافت چربی تشکیل شده است که همان  بستره بین لوبولی  است. لوبولها بوسیله یک بستره ظریف احاطه شده اند که بافت ویژه پستان است و خصوصیات پاسخ دهنده به هورمون دارد و دارای تعدادی  لنفوسیت می باشد  (85).  

 

 

 

فهرست مطالب

چکیده: 1

فصل اول:مقدمه 5

1-1- غدد پستانی 6

1-1-1- ساختار پستان نرمال 6

شکل (1-1 )- ساختار پستان نرمال (55) 7

1-1-2- تغییرات پستان در چرخه زندگی 8

1-2 -کارسینومای پستان 10

1-2-1-کارسینوما 10

1-2-2- ریسک فاکتورها 12

1-2-3- سبب شناسی سرطان پستان 16

1-2-5- سرطان پستان غیر وراثتی 19

1-2-5-1-2- تومور ساپرسورها 21

1-2-5-1-4- مسیرهای بقای سلولی و مرگ سلولی 23

1-2-5-1-4-1- تلومراز 23

1-2-5-1-4-2- ژن های وابسته به آپوپتوز 24

1-2-6-1- طبقه بندی کارسینوماهای پستان بر اساس مطالعات میکرواری (از لحاظ ملکولی) 26

1-2-6-1-1-کارسینوماهای ER- مثبت 26

1-2-6-1-2-کارسینومای های ER- منفی 26

1-2-6-1-3-کارسینوماهای  Basal-like 27

1-2-6-1-4-کارسینوماهای HER2/neu- مثبت 27

شکل 1-3- نمای شماتیک خانواده HER (90) 28

1-2-7- طبقه بندی کارسینوماهای پستان از لحاظ بافت شناسی 31

1-2-7-1- کارسینوما های در جا و تهاجمی(شکل 1-6 ) 31

شکل (1-5) – کارسینوماهای درجا و تهاجمی (85) 32

 

فصل دوم:مروری بر مطالعات انجام شده 34

2-1- تکنیک های سنجش HER2/neu 35

2-1-1- ایمونوهیستوشیمی (IHC) 35

2-1-2- ساترن و اسلات بلات 37

2-1-3-تکنیک FISH 37

2-1-4- تکنیک CISH ) (Chromogenic in situ hybridization 38

2-1-5- تکنیک ( Enzime – linked immunosorbent assay ) ELISA 38

2-2- وضعیت HER2 و پیشگویی پاسخ به درمان با هرسپتین 40

2-3- HER2/neu فسفریله به عنوان یک مارکرپروگنوستیک و پیش گویی بالقوه 41

2-4- سنجش بخش خارج سلولی HER2 در جریان خون به عنوان تومور مارکر 41

2-5- خلاصه 42

2-2- هدف 43

 

فصل سوم:مواد و روشها 44

مواد و روشها 44

3-1- استخراج RNA ی كل از بافت 45

3-2- بررسی كمی و كیفی RNA ی استخراج شده 50

3-2-1- UV اسپكتروفتومتری 50

3-2-2- الكتروفورز ژل آگارز (106) 52

طرز تهیه محلول ها و بافرهای مورد نیاز در الكتروفورز : 53

محلول اتیدیوم بروماید (10 mg /ml) 54

مواد و وسایل لازم 55

جدول 3-1 – رابطه درصد ژل آگارژ با اندازه مولكول DNA 58

3-3 تیمار RNAی استخراج شده با آنزیم DNase [149] 58

طرز تهیه مخلوط dNTP از هر یك از نوكلئوتیدها 60

3-5- واكنش PCR [2] 63

3-5-1 طراحی پرایمر: 63

3-5-2- آماده سازی پرایمرهای PCR [2] 66

3-7- استخراج DNA از بافت پستانداران با استفاده از Accuprep Genomic DNA Extraction kit (Bioneer) 70

3-7-1- سنجش غلظت DNA 71

3-9- ایمنوهیستوشیمی Immunohistochemical (IHC) Techniques 73

 

فصل چهارم:بحث و نتایج 76

بحث و نتایج 76

4-1- نتایج 77

4-1-1- تعیین کیفیت و کمیت RNA ی استخراجی 77

4-1-2- بهینه سازی واکنش PCR 78

4-1-3-  RT – PCR 80

4-2-  بحث و پیشنهادات 84

4-2-1- بحث 84

4-2-2- علت انتخاب RT- PCR 85

4-2-4- پیشنهادات 87

منابع 88

 

 

 

  • مطالعه تطبیقی بزه قتل در حقوق کیفری ایران و مصر

    مطالعه تطبیقی بزه قتل در حقوق کیفری ایران و مصر قتل در حقوق کیفری بزه قتل در حقوق کیفری ایران بزه قتل در حقوق کیفری مصر قتل در حقوق کیفری ایران و مصر دانلود پایان نامه قتل در حقوق کیفری…

  • ادبیات نظری و پیشینه تجربی محیط مدرسه

    ادبیات نظری و پیشینه تجربی محیط مدرسه کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه محیط مدرسه مبانی نظری محیط مدرسه پیشینه تحقیق محیط مدرسه پیشینه داخلی محیط مدرسه پیشینه خارجی محیط مدرسه پیشینه پژوهش محیط مدرسه پیشینه نظری محیط مدرسه…

  • پایان نامه سلامت روانی فرزندان

    پایان نامه سلامت روانی فرزندان کلمات کلیدی : پایان نامه سلامت روان پایان نامه سلامت روانی پایان نامه روانشناسی سلامت پایان نامه های سلامت روان پایان نامه درباره سلامت روانی پایان نامه سلامت روانی کودکان پایان نامه سلامت روانی دختران…

  • پاورپوینت کتاب حسابداری میانه 1 تالیف دکتر مهدی مشکی - عبدالکریم مقدم

    پاورپوینت کتاب حسابداری میانه 1 تالیف دکتر مهدی مشکی - عبدالکریم مقدم پاورپوینت کتاب حسابداری میانه 1 تالیف دکتر مهدی مشکی عبدالکریم مقدم رفتن به سایت اصلی پاورپوینت کتاب حسابداری میانه 1 تالیف دکتر مهدی مشکی - عبدالکریم مقدم انتشارات پیام…

  • ادبیات نظری و پیشینه تجربی اختلال بدشکلی بدن

    ادبیات نظری و پیشینه تجربی اختلال بدشکلی بدن کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه اختلال بدشکلی بدن مبانی نظری اختلال بدشکلی بدن پیشینه تحقیق اختلال بدشکلی بدن پیشینه داخلی اختلال بدشکلی بدن پیشینه خارجی اختلال بدشکلی بدن پیشینه پژوهش…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق هوشمندی بازاریابی

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق هوشمندی بازاریابی کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه هوشمندی بازاریابی مبانی نظری هوشمندی بازاریابی پیشینه تحقیق هوشمندی بازاریابی پیشینه داخلی هوشمندی بازاریابی پیشینه خارجی هوشمندی بازاریابی پیشینه پژوهش هوشمندی بازاریابی پیشینه نظری هوشمندی بازاریابی ادبیات…

  • پروپوزال ارائه الگوی مطلوب ارزیابی عملکرد پرسنل دانشگاه

    پروپوزال ارائه الگوی مطلوب ارزیابی عملکرد پرسنل دانشگاه پروپوزال ارزیابی عملکرد ارزیابی عملکرد کارکنان معیارهای ارزیابی عملکرد شاخص های ارزیابی عملکرد پروپوزال ارزیابی عملکرد کارکنان عوامل کلیدی موفقیت ارزیابی عملکرد کارکنان الگوی مناسب ارزیابی عملکرد کارکنان پروپوزال ارزیابی عملکرد کارکنان…

  • فصل دوم پایان نامه ارشد cloud computing

    فصل دوم پایان نامه ارشد cloud computing کلمات کلیدی : مبانی نظری cloud computing دانلود مبانی نظری cloud computing پیشینه تحقیق cloud computing دانلود پیشینه تحقیق cloud computing پیشینه داخلی cloud computing پیشینه خارجی cloud computing پیشینه پژوهش cloud computing…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق اخلاق 65 صفحه

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق اخلاق 65 صفحه کلمات کلیدی : مبانی نظری اخلاق ادبیات نظری اخلاق چارچوب نظری اخلاق فصل دوم پایان نامه اخلاق دانلود مبانی نظری اخلاق پیشینه تحقیق اخلاق پیشینه داخلی اخلاق پیشینه خارجی اخلاق پیشینه پژوهش…

  • پروپوزال بررسی مسئله حجاب و پوشش در بین مدارس متوسطه شهرستان نکا

    پروپوزال بررسی مسئله حجاب و پوشش در بین مدارس متوسطه شهرستان نکا پروپوزال حجاب پروپوزال حجاب و پوشش حجاب و پوشش در بین مدارس متوسطه بررسی مسئله حجاب و پوشش در مدارس پروپوزال حجاب و پوشش در بین مدارس متوسطه…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق توسعه پایدار 63 صفحه

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق توسعه پایدار 63 صفحه کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه توسعه پایدار مبانی نظری توسعه پایدار پیشینه تحقیق توسعه پایدار پیشینه داخلی توسعه پایدار پیشینه خارجی توسعه پایدار پیشینه پژوهش توسعه پایدار پیشینه نظری…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق ارزش ویژه برند 76 صفحه

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق ارزش ویژه برند 76 صفحه کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه ارزش ویژه برند مبانی نظری ارزش ویژه برند پیشینه تحقیق ارزش ویژه برند پیشینه داخلی ارزش ویژه برند پیشینه خارجی ارزش ویژه برند…

  • ارزیابی اثرات تنش خشکی بر صفات فیزیولوژیک آنیسون

    ارزیابی اثرات تنش خشکی بر صفات فیزیولوژیک آنیسون تاثیر تنش خشکی بر فتوسنتز تأثیر تنش خشکی بر گیاه اثرات تنش خشکی بر صفات فیزیولوژیک گیاهان تأثیر تنش خشکی بر فتوسنتز گیاه آنیسون تأثیر تنش خشکی بر محتوای نسبی آب گیاه…

  • دانلود پاورپوینت اصول مدیریت آموزشی

    دانلود پاورپوینت اصول مدیریت آموزشی دانلود پاورپوینت اصول مدیریت آموزشی پاورپوینت اصول مدیریت آموزشی پاورپوینت زمینه فرهنگی-اجتماعی مدیریت نظام آموزشی پاورپوینت تمرکز و عدم تمرکز در مدیریت آموزش و پرورش  پاورپوینت ویژگیهای بی همتای مدیریت آموزشی  رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت اصول مدیریت…

  • پاورپوینت کنفرانس تجارت و توسعه سازمان ملل متحد

    پاورپوینت کنفرانس تجارت و توسعه سازمان ملل متحد کلمات کلیدی : پاورپوینت کنفرانس تجارت و توسعه سازمان ملل متحد(UNCTAD) مقر آنکتاد اسامی دبیران کل آنکتاد پیشینه و روند شکل گیری آنکتاد معرفیکنفرانس تجارت و توسعه سازمان ملل متحد(UNCTAD) تقسیم بندی…

  • پاورپوینت آشنایی با ماشین های وایرکات

    پاورپوینت آشنایی با ماشین های وایرکات پاورپوینت آشنایی با ماشین های وایرکات آشنایی با عملیات wire cutting انواع ماشین وایرکات ماشین های وایرکات ساده ماشین های Wire cut edm آشنایی مقدماتی تعریف فرآیند ماشینکاری وایرکات کاربرد های وایرکات اجزاء ماشین…

  • پاورپوینت قاب نیمه صلب

    پاورپوینت قاب نیمه صلب پاورپوینت قاب پاورپوینت در مورد قاب نیمه صلب دانلود پاورپوینت قاب نیمه صلب رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت قاب نیمه صلب جهت رشته عمران در قالب 38 اسلاید و با فرمت بصورت کامل و جامع…

  • پاورپوینت تحلیل معماری بنای عالی قاپوی اصفهان

    پاورپوینت تحلیل معماری بنای عالی قاپوی اصفهان پاورپوینت بنای عالی قاپوی اصفهان پاورپوینت عالی قاپو اصفهان پاورپوینت در مورد کاخ عالی قاپو اصفهان دانلود پاورپوینت کاخ عالی قاپو اصفهان پاورپوینت کاخ عالی قاپو اصفهان رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت…

  • پیشینه نظری و فصل دوم پایان نامه بلوغ سازمانی

    پیشینه نظری و فصل دوم پایان نامه بلوغ سازمانی کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه بلوغ سازمانی مبانی نظری بلوغ سازمانی پیشینه تحقیق بلوغ سازمانی پیشینه داخلی بلوغ سازمانی پیشینه خارجی بلوغ سازمانی پیشینه پژوهش بلوغ سازمانی پیشینه نظری…

  • پاورپوینت مخاطرات زمين

    پاورپوینت مخاطرات زمين رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت مخاطرات زمين جهت رشته ی زمین شناسی در قالب 75 اسلاید و با فرمت pptx به صورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش       بلايای طبيعی حوادثی طبيعی…

  • تحلیل نقاشی های کودکان کار

    تحلیل نقاشی های کودکان کار تحلیل نقاشی های کودکان کار کودکان کار تصویرسازی کودکان کار بداهه سازی کودکان کار ناهنجاری و اختلالات روحی و روانی کودکان کار نقاشی های کودکان کار تصویرسازی کودکان کار تحلیل تصویرسازی های کودکان کار تصویرسازی…

  • دانلود پاورپوینت معماری سازمانی

    دانلود پاورپوینت معماری سازمانی معماری سازمانی ppt پاورپوینت معماری سازمانی پاورپوینت آموزش معماری سازمانی دانلود پاورپوینت در مورد معماری سازمانی رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت معماري سازماني جهت رشته مدیریت در قالب 25 اسلاید و با فرمت بصورت کامل…

  • عوامل داخلی و خارجی تغییر کابینه و انتصاب آموزگار

    عوامل داخلی و خارجی تغییر کابینه و انتصاب آموزگار عملکرد دولت هویدا علل انتصاب آموزگار رفتن به سایت اصلی دانلود پایان نامه رشته علوم سیاسی عوامل داخلی و خارجی تغییر کابینه و انتصاب آموزگار       چکیده: در این…

  • پاورپوینت تصاویر مراحل رشد گیاه کلزا

    پاورپوینت تصاویر مراحل رشد گیاه کلزا پاورپوینت گیاه شناسی کلزا پاورپوینت کلزا پاورپوینت کشت کلزا پاورپوینت گیاه کلزا پاورپوینت در مورد گیاه کلزا رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت تصاویر مراحل رشد گیاه کلزا جهت رشته کشاورزی و زراعت در…

  • جزوه مدیریت مالی 1- پیام نور + پاسخ تمرینات هر فصل

    جزوه مدیریت مالی 1- پیام نور + پاسخ تمرینات هر فصل کلمات کلیدی : جزوه مدیریت مالی 1- پیام نور + پاسخ تمرینات هر فصل رفتن به سایت اصلی جزوه مدیریت مالی 1- پیام نور + پاسخ تمرینات هر فصل…

  • مبانی مسئولیت کیفری اطفال در مکاتب کیفری و قوانین موضوعه

    مبانی مسئولیت کیفری اطفال در مکاتب کیفری و قوانین موضوعه کیفیات مخففه در قانون جدید مبانی مسئولیت کیفری اطفال در مکاتب کیفری مسئولیت کیفری اطفال در قوانین موضوعه آثار کیفیات مخففه در اعمال مجازات ها کیفیات مخففه در خصوص کودکان…

  • پیش بینی بازده سهام بر اساس حجم معاملات سهام به عنوان جایگزین سایر متغیرها

    پیش بینی بازده سهام بر اساس حجم معاملات سهام به عنوان جایگزین سایر متغیرها بازده سهام حجم معاملات سهام حجم معامله در بورس دانلود پایان نامه حجم معامله اثر حجم معامله در رابطه بین سود و بازده ارائه مدل مناسبی…

  • مبانی نظری و پیشینه تحقیق ارزیابی عملکرد کارکنان 40 صفحه

    مبانی نظری و پیشینه تحقیق ارزیابی عملکرد کارکنان 40 صفحه کلمات کلیدی : فصل دوم پایان نامه ارزیابی عملکرد کارکنان مبانی نظری ارزیابی عملکرد کارکنان پیشینه تحقیق ارزیابی عملکرد کارکنان پیشینه داخلی ارزیابی عملکرد کارکنان پیشینه خارجی ارزیابی عملکرد کارکنان…

  • پاورپوینت مجتمع های مسکونی و توصیه و الزامات تهیه طرح معماری

    پاورپوینت مجتمع های مسکونی و توصیه و الزامات تهیه طرح معماری پاورپوینت استانداردهای طراحی شهرک مسکونی پاورپوینت ضوابط طراحی مجتمع های مسکونی پاورپوینت ضوابط طراحی مجتمع مسکونی پاورپوینت ضوابط و استانداردهای طراحی مجتمع مسکونی رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت مجتمع…

  • نقد تخیلی نقاشی معاصر ایران با تاکید بر ماهیت طبیعت در آثار نقاشان

    نقد تخیلی نقاشی معاصر ایران با تاکید بر ماهیت طبیعت در آثار نقاشان نقد تخیلی نقاشی معاصر ایران نقاشان معاصر ایران مفهوم طبیعت در آثار نقاشی نقد تخیلی نقاشی معاصر ایران نقد تخیلی نقاشی معاصر ایران با تاکید بر ماهیت…

  • پاورپوینت کارگاه تربیت جنسی کودک و ضرورت آن

    پاورپوینت کارگاه تربیت جنسی کودک و ضرورت آن رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت کارگاه تربیت جنسی کودک و ضرورت آن جهت رشته روانشناسی در قالب 7 اسلاید و با فرمت pptx بصورت کامل و جامع و با قابلیت ویرایش…

  • پاورپوینت مدیریت ریسک و نقش آن در محیط کار

    پاورپوینت مدیریت ریسک و نقش آن در محیط کار پاورپوینت نقش مدیریت ریسک در محیط کار پاورپوینت مدیریت ریسک چیست پاورپوینت مدیریت ریسک پروژه پاورپوینت مدیریت ریسک در کسب و کار رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت مدیریت ریسک و…

  • حقوق کودکان متولد از طرق مختلف تلقیح مصنوعی (آپدیت شده 504 صفحه)

    حقوق کودکان متولد از طرق مختلف تلقیح مصنوعی (آپدیت شده 504 صفحه) حقوق کودکان متولد ازاهدای جنین حقوق کودکان متولد ازاهدا تخمک حقوق کودکان متولد ازرحم جایگزین حقوق کودکان متولد ازاهدای اسپرم دانلود پایان نامه تلقیح مصنوعی دانلود پایان نامه…

  • شبیه سازی موانع عقب خودرو با استفاده از 4 سنسور مافوق صوت (آپدیت شده)

    شبیه سازی موانع عقب خودرو با استفاده از 4 سنسور مافوق صوت (آپدیت شده) میکروکنترلر سنسور سنسور مافوق صوت شبیه سازی موانع عقب خودرو سنسور التراسونیک شبیه سازی موانع عقب خودرو با استفاده از 4 سنسور مافوق صوت شبیه سازی…

  • پاورپوینت آشنایی با رابطه مدیریت استراتژیک و مدیریت منابع انسانی

    پاورپوینت آشنایی با رابطه مدیریت استراتژیک و مدیریت منابع انسانی رفتن به سايت اصلي دانلود پاورپوینت آشنایی با رابطه مدیریت استراتژیک و مدیریت منابع انسانی جهت رشته مدیریت در قالب 29 اسلايد و با فرمت pptx به صورت کامل و…